近幾年，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室在新藥研發(fā)中發(fā)揮著重要作用。然而，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室中的支原體污染和噬菌體污染問題也越來越引起人們的關(guān)注。
一、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室支原體污染、噬菌體污染危害
1、支原體污染的危害
支原體是一種細(xì)菌樣微生物，可以引起多種疾病，包括肺炎、結(jié)膜炎和生殖道感染等。支原體污染會對細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，甚至?xí)?dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的錯誤解讀。支原體污染還可能對實(shí)驗(yàn)人員的健康造成威脅。
支原體是一種大小介于細(xì)菌和病毒之間(直徑0.2um)并獨(dú)立生活的微生物，約有1%可通過濾菌器。支原體無細(xì)胞壁形態(tài)呈高度多形性，可為圓形、絲狀或梨形，在光境下不易看清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。多數(shù)支原體適合于偏堿條件下生存(PH7．6—8．0)，對酸耐受性差，對熱比較敏感，對一般抗生素不敏感。支原體污染細(xì)胞后，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁，多數(shù)情況下細(xì)胞病理變化輕微或不顯著，細(xì)微變化也可由于傳代、換液而緩解，因此易被忽視。但個別嚴(yán)重情況，可致細(xì)胞增殖緩慢，甚至從培養(yǎng)器皿脫落。如何確定是否有支原體污染，一般可用培養(yǎng)法或熒光染色法檢測，市場上有多種支原體檢測的試劑盒，兩步操作，20min出結(jié)果，靈敏度較高、速度比較快、操作簡單靈敏，可檢出的支原體覆蓋范圍非常比較廣，超過130（亞）種。
2、噬菌體污染的危害
噬菌體是一種寄生于細(xì)菌上的病毒，可以感染并破壞細(xì)菌。噬菌體污染會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，影響實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。此外，噬菌體污染還可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的誤解和實(shí)驗(yàn)人員的健康威脅。
今天我們主要來講一下實(shí)驗(yàn)室支原體污染原因及解決方法！
二、引起支原體污染的原因
1、支原體通過難以追蹤的各種來源進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)物。其中包括實(shí)驗(yàn)室人員、血清、細(xì)胞培養(yǎng)基、水浴鍋、培養(yǎng)箱等。人為污染是上述污染源中的污染源。污染物可以通過臟衣服、實(shí)驗(yàn)室服裝、人在層流氣流附近的講話、人的頭皮、打噴嚏、咳嗽等傳播。此外，無論細(xì)胞培養(yǎng)物在哪里，人員不斷流入都會增加污染的風(fēng)險。
2、支原體可以通過交叉污染和不良的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)從這些來源傳播。這些措施包括對多個細(xì)胞系重復(fù)使用移液器，而不是使用一次性移液器或重復(fù)使用手套。血清也是支原體污染的來源。由于其渾濁的性質(zhì)，在每種細(xì)胞培養(yǎng)中常用的血清中很難檢測到污染。每次傳代重復(fù)使用同一瓶血清可以促進(jìn)支原體的生長。血清營養(yǎng)豐富，也是支原體增殖的來源。此外，它是在高壓滅菌后添加到培養(yǎng)基中的，因此無法保證血清無污染。
支原體可以更長時間地保持干燥狀態(tài)。當(dāng)它們接觸到營養(yǎng)源時，它們會很快開始增殖。一旦它們出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中，就很難根除。你可以抑制支原體的生長，但不能完全根除它。當(dāng)在培養(yǎng)物中發(fā)現(xiàn)支原體時，丟棄培養(yǎng)瓶是一個不錯的選擇（除非培養(yǎng)物來源不可替代或非常昂貴）。
三、實(shí)驗(yàn)室支原體污染如何快速解決？
當(dāng)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生支原體和噬菌體污染時，應(yīng)該采用有效的消毒方法進(jìn)行清理。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室支原體污染和噬菌體污染是新藥研發(fā)中需要重視的問題。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該采取有效的措施預(yù)防和處理支原體污染和噬菌體污染。實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)該加強(qiáng)對實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生和個人衛(wèi)生的重視，避免細(xì)菌和病毒的污染。實(shí)驗(yàn)室管理者應(yīng)該定期對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測和消毒，及時發(fā)現(xiàn)和處理污染問題。
細(xì)胞房污染后的處理步驟如下：
確認(rèn)同批次細(xì)胞是否也被污染。檢查細(xì)胞培養(yǎng)的同批次是否也顯示異常跡象，如細(xì)胞形態(tài)改變、生長受阻等。
確認(rèn)培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)用液是否也被污染。
進(jìn)行培養(yǎng)基和血清的污染測試：在培養(yǎng)板中加入少量培養(yǎng)基及培養(yǎng)基和血清的混合物，培養(yǎng)48小時觀察有無污染現(xiàn)象。
處理細(xì)胞房污染：
1）. 硫酸銅擦洗和乳酸熏蒸：
a. 使用5%硫酸銅溶液充分擦洗細(xì)胞培養(yǎng)箱的內(nèi)部表面，確保涂覆均勻。
b. 使用酒精進(jìn)行噴霧消毒，覆蓋整個細(xì)胞房內(nèi)的表面。
c. 使用高溫灼燒，提高培養(yǎng)箱的溫度，以殺滅污染源。
d. 整個細(xì)胞房用乳酸進(jìn)行熏蒸一夜，確保無菌狀態(tài)。
e. ，使用紫外燈照射培養(yǎng)箱內(nèi)部12小時，以確保殺滅任何殘留的微生物。
2）. 新潔爾滅擦拭和紫外燈照射：
a. 使用1%新潔爾滅擦拭整個細(xì)胞房的內(nèi)部表面，確保均勻覆蓋。
b. 打開紫外燈，照射整個細(xì)胞房內(nèi)部，包括工作臺和設(shè)備，確保細(xì)菌被殺滅。
3). 甲醛熏蒸法：
a. 準(zhǔn)備甲醛溶液，每立方米加甲醛80ml，高錳酸鉀40g，按照2:1的比例混合，要快速混合以避免產(chǎn)生危險的氧化反應(yīng)。
b. 將甲醛溶液置于細(xì)胞房內(nèi)，確保細(xì)胞房密閉。
c. 熏蒸細(xì)胞房密閉24-48小時，以確保各種微生物被殺滅。
d. ，排風(fēng)使甲醛排放出去，確保細(xì)胞房內(nèi)沒有刺激性氣味。
上述均為常規(guī)做法，操作過程相對復(fù)雜，消毒滅菌相對不夠徹底，甲醛對人體傷害較高，目前很少細(xì)胞房用此種方式。潤聯(lián)致力于生命科學(xué)行業(yè)多年，擁有完善的整套實(shí)驗(yàn)室污染解決方案和設(shè)備。
潤聯(lián)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室上門消毒服務(wù)服務(wù)準(zhǔn)則：一二線主要城市快速響應(yīng)、高效徹底解決污染、安全友好。
潤聯(lián)生命科學(xué)，專注消毒十余年，專業(yè)解決細(xì)胞間支原體污染、真菌污染問題、噬菌體污染問題、黑膠蟲污染問題，治理經(jīng)驗(yàn)豐富，可提供上門消毒服務(wù)和指導(dǎo)，為實(shí)驗(yàn)室提供空間環(huán)境消毒服務(wù)，有專業(yè)團(tuán)隊(duì)專門負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室全面消毒滅菌，快速安全高效處理，不影響實(shí)驗(yàn)室使用和科研進(jìn)度。
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