seline; color: rgb(51, 51, 51);">
seline; color: rgb(51, 51, 51);">發(fā)酵企業(yè)一般當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)量下降時(shí),懷疑噬菌體污染問題。證明細(xì)菌:將發(fā)酵液拿來做菌株純化,看看有沒有雜菌落,若有可疑菌落,進(jìn)一步鏡檢因此可以得證雜菌污染。否則懷疑噬菌體污染。
seline; color: rgb(51, 51, 51);">噬菌體污染:一般如果為烈性噬菌體污染很好判斷(發(fā)酵液不能增菌) 但污染了溫和噬菌體就很難處理。
seline; color: rgb(51, 51, 51);">證明:拿已知的原始菌株(無(wú)噬菌體感染的)作為寄主做平板涂布,將發(fā)酵液直接點(diǎn)植在平板上,并做好位置。記號(hào),培養(yǎng)觀察,在點(diǎn)植處若出現(xiàn)半透明噬菌斑,那肯定是溫和噬菌體污染了。
seline; color: rgb(51, 51, 51);">
seline; color: rgb(51, 51, 51);">噬菌體污染往往是先從發(fā)酵罐開始的,然后才波及到種子罐。如果細(xì)心觀察可以發(fā)現(xiàn),當(dāng)你的發(fā)酵罐不正常的時(shí)候往往種子罐的種子在鏡檢時(shí)也有異常菌體出現(xiàn)。
seline; color: rgb(51, 51, 51);">
seline; color: rgb(51, 51, 51);">通氣發(fā)酵,空氣過濾器對(duì)噬菌體的截留能力不一定很好。一般噬菌體要比空氣過濾器的孔徑還小的多,能夠完全進(jìn)入到發(fā)酵罐中。一般發(fā)酵罐的通氣量要比種子罐大,所以也會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵罐比種子罐提前表現(xiàn)出來。
seline; color: rgb(51, 51, 51);">噬菌體防治是個(gè)很頭疼的問題,涉及到菌種、空氣、環(huán)境、設(shè)備等等。積極的方法是選育抗噬菌株。但在平時(shí)也,應(yīng)該做好環(huán)境的消毒工作。消毒重點(diǎn)在于發(fā)酵罐,管路,及空間。
seline; color: rgb(51, 51, 51);">
seline; color: rgb(51, 51, 51);">噬菌體是一類專性寄生于細(xì)菌和放線菌等微生物的病毒,其個(gè)體形態(tài)極其微小,用常規(guī)微生物計(jì)數(shù)法無(wú)法測(cè)得其數(shù)量。當(dāng)烈性噬菌體侵染細(xì)菌后會(huì)迅速引起敏感細(xì)菌裂解,釋放出大量子代噬菌體,然后它們?cè)贁U(kuò)散和侵染周圍細(xì)胞,終使含有敏感菌的懸液由混濁逐漸變清,或在含有敏感細(xì)菌的平板上出現(xiàn)肉眼可見的空斑──噬菌斑。了解噬菌體的特性,快速檢查、分離,并進(jìn)行效價(jià)測(cè)定,對(duì)在生產(chǎn)和科研工作中防止噬菌體的污染具有重要作用吖。
檢樣可以是發(fā)酵液、空氣、污水、土壤等(至于無(wú)法采樣而需檢查的對(duì)象,可以用無(wú)菌水浸濕的棉花涂拭表面作為檢查樣品)。為了易于分離可先經(jīng)增殖培養(yǎng),使樣品中的噬菌體數(shù)量增加。
采用微生物測(cè)定法進(jìn)行噬菌體檢測(cè),約需12h左右,因而不能及時(shí)判斷是否有噬菌體污染。通過快速檢測(cè)可大致確定是否有噬菌體污染,以采取必要的防治措施。根據(jù)正常發(fā)酵(培養(yǎng))液離心后菌體沉淀,上清液蛋白含量很少,加熱后仍然清亮;而侵染有噬菌體的發(fā)酵(培養(yǎng))液經(jīng)離心后其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白,加熱后發(fā)生蛋白質(zhì)變性,因而在光線照射下出現(xiàn)丁達(dá)爾效應(yīng)而不清亮。此法簡(jiǎn)單、快速,對(duì)發(fā)酵液污染噬菌體的判斷亦較準(zhǔn)確。但不適于溶源性細(xì)菌及溫合噬菌體的診斷,對(duì)侵染噬菌體較少的一級(jí)種子培養(yǎng)液也往往不適用。
一旦發(fā)酵菌浸染噬菌體后,就要從菌種,培養(yǎng)基,環(huán)境,發(fā)酵系統(tǒng)管路,地溝,污水池,排風(fēng)口等進(jìn)行全面的消毒排查,物理消毒方式通常很難將噬菌體消除,通常需要物理和化學(xué)方式相結(jié)合處理噬菌體污染。
必要暫停發(fā)酵培養(yǎng)工作,對(duì)整個(gè)發(fā)酵環(huán)境,管路,器材進(jìn)行消毒處理,可用紫外燈照射加過氧化氫干霧熏蒸的方式對(duì)整個(gè)發(fā)酵場(chǎng)所進(jìn)行消毒,在不影響生產(chǎn)的情況,可以停止發(fā)酵一個(gè)月的時(shí)間,讓發(fā)酵環(huán)境的活大腸桿菌消除或減少到限度。
發(fā)酵生產(chǎn)環(huán)境或?qū)嶒?yàn)室空間化學(xué)熏蒸比較安全可靠的方法是過氧化氫氣體滅菌方式,代替?zhèn)魅居泻τ卸镜募兹┭?。過氧乙酸和甲醛已被否定,目前流行和被接受的是VHP過氧化氫空間滅菌,其廣譜、高效、安全無(wú)害,無(wú)殘留的消毒方法成為新一代選擇。在解決發(fā)酵生產(chǎn)中預(yù)防和防治噬菌體浸染問題具有重大意義,這里需增強(qiáng)防重于治的意識(shí),也就是說需要定期的環(huán)境空間全面熏蒸消毒。那么過氧化氫干霧滅菌裝置必不可少,因?yàn)橐?jīng)常使用,并且可以短時(shí)間內(nèi)完成消毒,運(yùn)行成本低,不能造成不良腐蝕影響等。
潤(rùn)聯(lián)為發(fā)酵類生產(chǎn)企業(yè),生物制藥企業(yè),科研場(chǎng)所,提供精準(zhǔn)的噬菌體污染解決方案.歐菲姆智能化微生物污染去除設(shè)備適用于大型生產(chǎn)車間使用,極大程度地降低噬菌體污染的風(fēng)險(xiǎn).潤(rùn)聯(lián)專注解決國(guó)內(nèi)行業(yè)微生物污染問題. 潤(rùn)聯(lián)打造了一套高效,環(huán)保、可監(jiān)控、 系統(tǒng)化的控制方案。為發(fā)酵類生產(chǎn)企業(yè),生物制藥企業(yè),科研場(chǎng)所,提供精準(zhǔn)的噬菌體污染解決方案.
全國(guó)服務(wù)及合作熱線:黃工18938977869 微信同號(hào)