逗點(diǎn)生物新推出飼料中硝基呋喃類藥物檢測(cè)萃取方法MCX

飼料中硝基呋喃類藥物檢測(cè)的固相萃取方法

（Copure ® MCX）

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測(cè)飼料中硝基呋喃類藥物的含量。 該方法可簡(jiǎn)化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡(jiǎn)便。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物
呋喃唑酮 (CAS:67-45-8)。

三、應(yīng)用范圍
本方法適用于飼料中硝基呋喃類藥物的檢測(cè)的HPLC檢測(cè)及確證。

四、參考標(biāo)準(zhǔn)
農(nóng)業(yè)部1486號(hào)公告-8-2010 《飼料中硝基呋喃類藥物的測(cè)定 高效液相色譜法》

五、實(shí)驗(yàn)材料
biocomma ® Copure ® MCX固相萃取柱60 mg/3 mL (Cat. No. COMCX360)。

六、實(shí)驗(yàn)步驟
1、樣品提取
 準(zhǔn)確移取飼料1.0 g于50 mL離心管中加入25 mL乙腈，渦旋1 min分散均勻，65℃超生提取15 min，每隔5 min手搖一次。3800 r / min離心15 min。取上清液5 mL于100 mL雞心瓶中，50℃ 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。往雞心瓶中 加2%甲酸水溶液5 mL，超聲2min，渦動(dòng)1min充分溶解，備用。

2、SPE柱凈化
 (1)活化：MCX固相萃取柱使用前用3mL甲醇、3mL 2%甲酸水溶液活化。  (2)上樣和洗脫: 往固相萃取柱中加入2%甲酸水溶液提取備用液，棄去流出液；加入3mL水淋洗，棄去淋洗液；  3mL固相萃取柱洗脫液（1%氨水水溶液：甲醇=3：7）洗脫收集洗脫液(整個(gè)上樣淋洗洗脫過程中流速保持 <1mL/min)。
(3)重新溶解: 50 ℃緩慢氮?dú)饬鳁l件下吹至近干，0.22μm濾膜過濾，濾液上機(jī)測(cè)試。

3、HPLC條件
設(shè) 備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)
檢測(cè)器 ：Waters 2487 紫外檢測(cè)器
梯度洗脫 ： A：乙腈 B：0.05% 乙酸銨溶液
表1: 梯度洗脫條件

流速：1.0 mL/min
檢測(cè)波長(zhǎng)：365 nm
進(jìn)樣體積:20 μL

七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、2 mg/kg飼料中呋喃唑酮的添加回收結(jié)果
表1 2 mg/kg飼料中呋喃唑酮的添加回收結(jié)果

2、添加水平為2 mg/kg飼料中呋喃唑酮檢測(cè)的液相色譜圖
圖1 添加水平為2 mg/kg飼料中呋喃唑酮檢測(cè)的液相色譜圖