pcr儀溫度校準(zhǔn)裝置、pcr儀溫度驗證系統(tǒng)、pcr校準(zhǔn)設(shè)備

 PCR是聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction)的簡稱，是在短時間內(nèi)體外大量擴增特定的DNA段的分子生物學(xué)技術(shù)。自動完成聚合酶鏈反應(yīng)，提供DNA 擴增的溫度條件而設(shè)計的儀器稱為PCR儀。

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二、 PCR儀溫度校準(zhǔn)的項目及必要性
一個穩(wěn)定的溫度循環(huán)是成功實現(xiàn)PCR所必需的。其中溫度控制的動、穩(wěn)態(tài)特性是影響PCR擴增結(jié)果正確與否的重要因素之一, 這包括溫度準(zhǔn)確性、升降溫速度、溫場均勻性、max超調(diào)溫度。
（一）、溫度準(zhǔn)確性
溫度準(zhǔn)確性是PCR儀重要的性能指標(biāo)，如溫度準(zhǔn)確性低可直接造成非特異性擴增，甚至是錯誤的擴增結(jié)果，造成假陽性和假陰性。
市場上各家廠商考核基因擴增儀（PCR儀）性能的主要指標(biāo)，一般廠家的企業(yè)指標(biāo)為±0.5℃，一些性能較好的產(chǎn)品可以實現(xiàn)的溫度準(zhǔn)確度為±0.3℃。故需對PCR儀控溫準(zhǔn)確度進行測試。
    校準(zhǔn)實驗平均溫度的計算公式為：I—參加檢測的溫度探頭序號；n—參加檢測的溫度探頭的數(shù)量
（二）、溫場均勻性
    由于PCR儀加熱器加熱不均勻，導(dǎo)致PCR儀模塊上各孔存在一定溫差。造成試驗結(jié)果偏差。一般PCR儀邊緣點的溫度低于中間區(qū)域，所以均勻性為PCR儀重要的性能指標(biāo)。一般廠家的企業(yè)指標(biāo)規(guī)定均勻性為±0.5℃，一些性能較好的產(chǎn)品可以實現(xiàn)的溫度均勻度為±0.3℃。
    校準(zhǔn)實驗時，通過選取孔板中16個特殊反應(yīng)位置來測量溫度，并得出孔板的溫度均勻性。均勻性為各個探頭在同一時刻max溫度與min 溫度的差值。均勻度計算公式為：tmax-tmin  
（三）、升降溫速率
PCR擴增產(chǎn)物數(shù)量的多少決定了PCR的效率。為了在短時間內(nèi)獲得盡可能多的產(chǎn)物，需要儀器在升降溫段具有按照預(yù)設(shè)升降溫速率快速升溫和降溫的能力（max-升溫速率達15~20℃）。一個完整的PCR過程，是由若干個升溫→恒溫→降溫循環(huán)構(gòu)成的。因為“變性”，“退火”和“延伸”3個階段是必須要保證的。因此，只有使升降溫的過程盡可能地迅速，才能縮短每個PCR循環(huán)以及整個PCR 過程所需時間。一般廠家的企業(yè)指標(biāo)規(guī)定升溫速率為±3℃/sec。
儀器校準(zhǔn)實驗時，升溫速率為溫度從40℃到90℃的時間；降溫速率為溫度從70℃到35℃的時間。
（四）、max-超調(diào)溫度
    當(dāng)溫度從一定點溫度調(diào)節(jié)到另一定點溫度,就會產(chǎn)生溫度的超調(diào)。超調(diào)溫度過大同樣會對試驗產(chǎn)生影響，所以校準(zhǔn)實驗時，需要計算max-超調(diào)溫度和平均超調(diào)溫度。

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三、解決方案
根據(jù)基因擴增儀(PCR儀)測溫系統(tǒng)校準(zhǔn)規(guī)范溫度校準(zhǔn)系統(tǒng)，依據(jù)

的要求，我們公司推出了PCRCAL來校準(zhǔn)pcr儀。
具體方案 產(chǎn)品包括ZCPCRCAL-96W、ZCPCRCAL-96S、ZCPCRCAL-48S、ZCPCRCAL-32S。4種型號，可滿足大多數(shù) 24孔，48孔，96孔的PCR儀的計量校準(zhǔn)需求。、

系統(tǒng)采用高精度多路測溫儀，高精度/高靈敏度的熱敏電阻探頭，采用高端加工工藝，保證探頭與孔間的充分接觸，應(yīng)用專業(yè)的溫度驗證系統(tǒng)軟件，實現(xiàn)校準(zhǔn)自動化，自動保存原始記錄，自動生成校準(zhǔn)報告。校準(zhǔn)過程中，系統(tǒng)軟件實時記錄數(shù)據(jù)，并生成趨勢圖；系統(tǒng)自動計算校準(zhǔn)結(jié)果所需要的溫度示值誤差、溫度均勻性，升降溫速率等參數(shù)。

為保證系統(tǒng)的測量精度實現(xiàn)系統(tǒng)傳感器溫度的標(biāo)定，可使用PCR儀溫度驗證系統(tǒng)軟件 配合我公司提供的ZCTB系列高精度恒溫槽，校準(zhǔn)等溫塊，高精度多路測溫儀，二等標(biāo)準(zhǔn)溫度計等裝置對驗證探頭進行校準(zhǔn)。

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