|
公司基本資料信息
|
組份名稱 | 規(guī)格 | 備注 |
酶標(biāo)板 | 96T | 其它各規(guī)格裝量按比例增加或減少,具體裝量以實(shí)物為準(zhǔn)。 |
標(biāo)準(zhǔn)品×6瓶* | 1mL | |
RAC酶標(biāo)Ⅱ抗?jié)饪s液(11×) | 0.8mL | |
RAC抗體工作液 | 8mL | |
RAC緩沖液A | 4mL | |
RAC緩沖液B | 4mL | |
RAC緩沖液C | 4mL | |
底物A液 | 7mL | |
底物B液 | 7mL | |
終止液 | 7mL | |
濃縮洗滌液(20×) | 25mL |
配液1: 洗滌工作液
用去離子水將濃縮洗滌液(20×)按1 : 19體積比進(jìn)行稀釋,即1份濃縮洗滌液(25×)加19份去離子水。用于酶標(biāo)板的洗滌,洗滌工作液在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月。配液2: 組織提取液
稱取1 g三氯乙酸,加入100 mL去離子水充分溶解。
配液3: 0.5 M 氫氧化鈉溶液稱取2 g氫氧化鈉,加入100 mL去離子水充分溶解。
注:組織提取液、0.5 M 氫氧化鈉溶液室溫條件下可保存2周,過(guò)期需重新配制!┅┅檢測(cè)前需在樣品孔內(nèi)先加入20 μL萊克多巴胺緩沖液A;
┅┅取20 μL尿樣進(jìn)行檢測(cè)。
(二)牛尿(稀釋系數(shù):2)┅┅檢測(cè)前需在樣品孔內(nèi)先加入20 μL萊克多巴胺緩沖液B;┅┅取20 μL尿樣進(jìn)行檢測(cè)。注:若尿樣渾濁,可4000 g離心5 min后取上清液進(jìn)行檢測(cè)。(三)組織(豬肉、豬肝、羊肉、羊肝、牛肉)(稀釋系數(shù):8)注:此方法處理的樣本可同時(shí)檢測(cè)克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇!┅┅準(zhǔn)確稱取2±0.01g新鮮組織樣本于50mL離心管中;┅┅加入3 mL洗滌工作液(配液1),再加入3 mL組織提取液(配液2),高速渦動(dòng)1 min;┅┅4000 g以上離心5 min;
┅┅取1 mL中間清液于新的離心管中;注:避免取到上、下層固體,否則影響檢測(cè)結(jié)果!┅┅加入40 μL 0.5 M 氫氧化鈉溶液(配液3),渦動(dòng)10 s混勻;┅┅4000 g以上離心5 min;
┅┅取20 μL進(jìn)行檢測(cè)。4、檢測(cè)豬尿、羊尿:將20 μL萊克多巴胺緩沖液A加入樣品孔,再加入20 μL尿樣;
5、檢測(cè)牛尿:將20 μL萊克多巴胺緩沖液B加入樣品孔,再加入20 μL尿樣;6、檢測(cè)組織:將20 μL萊克多巴胺緩沖液C加入樣品孔,再加入20 μL樣品加入樣品孔中;7、萊克多巴胺酶標(biāo)Ⅱ抗?jié)饪s液與抗體工作液的混合:按1:10體積比混合(取1份萊克多巴胺酶標(biāo)Ⅱ抗?jié)饪s液+10份萊克多巴胺抗體工作液),輕柔混勻。室溫(25±2℃)平衡20-30 min;注:操作中應(yīng)嚴(yán)格控制該步驟時(shí)間,即混合液平衡20-30min后立即使用!8、每孔加入60 μL酶標(biāo)Ⅱ抗--抗體混合液(見(jiàn)9.6);9、蓋好蓋板膜,輕輕振蕩酶標(biāo)板10 s,充分混勻,室溫下(25±2℃)避光反應(yīng)30 min;10、洗板:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌工作液260μL/孔,充分洗滌4次,每次浸泡15-30s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。11、顯色:立即在每孔中加入100 μL底物A、B混合液;蓋好蓋板膜,輕輕振蕩酶標(biāo)板10 s,充分混勻,室溫下(25±2℃)避光反應(yīng)15-20 min;注:底物A液、底物B液按體積1:1混合,必須充分混勻,混合液在5 min內(nèi)使用,避免使用金屬盛裝、攪拌試劑!12、終止:揭開(kāi)蓋板膜,每孔中加入50 μL終止液,輕輕振蕩酶標(biāo)板10 s,充分混勻;
13、讀數(shù):終止后5 min內(nèi)用酶標(biāo)儀在雙波長(zhǎng)450 nm、630 nm下讀取酶標(biāo)板吸光度值。
1. 各標(biāo)準(zhǔn)品(或樣品)的平均吸光度值,除以零標(biāo)(濃度為0 ppb的標(biāo)準(zhǔn)品)吸光度值,乘以100,可以得到各標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)的吸光度的百分比。
2. 將各標(biāo)準(zhǔn)品所得值輸入半對(duì)數(shù)系統(tǒng)中,與對(duì)應(yīng)各標(biāo)準(zhǔn)品濃度可以擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,請(qǐng)參見(jiàn)“標(biāo)準(zhǔn)曲線參考圖”。
3. 將樣品吸光度的百分比代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,可得出樣品對(duì)應(yīng)的濃度,再乘以相應(yīng)樣品的稀釋倍數(shù),方得樣品實(shí)際含量。
十、試劑盒參數(shù)試劑盒靈敏度:0.03 ppb精密度:試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于5%,板間誤差小于10%?;厥章剩?nbsp; 豬尿、羊尿………………90%±20% 牛尿………………………±20% 組織………………………90%±30%樣品檢測(cè)限: 組織、豬尿、牛尿、羊尿…………約0.5ppb 特異性:萊克多巴胺酶聯(lián)免疫試劑盒的特異性是通過(guò)與相應(yīng)的物質(zhì)進(jìn)行交叉反應(yīng)試驗(yàn)來(lái)確定的,結(jié)果如下:萊克多巴胺……………..…多巴判丁胺、馬布特羅、利托君、克倫丙羅、西馬特羅、塞布特羅、克倫特羅、沙丁胺醇、溴布特羅、卡布特羅............................................<0.1 %
十一、注意事項(xiàng)責(zé)權(quán)聲明:
①本版塊的所有文章及圖片均為客戶自行編輯,其版權(quán)為客戶所有,客戶需保證其編輯的文章及圖片均無(wú)侵犯任何第三方的合法權(quán)益,如被第三方維權(quán),由客戶承擔(dān)全部責(zé)任;
② 本網(wǎng)站僅為展示平臺(tái),如要轉(zhuǎn)載,請(qǐng)與我網(wǎng)站聯(lián)系協(xié)助獲得授權(quán);
③發(fā)布內(nèi)容如有侵權(quán),請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我網(wǎng)站進(jìn)行刪除。
※ 聯(lián)系電話:400-854-6788