赭曲霉毒素Ａ總量ELISA定量檢測(cè)試劑盒赭曲霉毒素是一類真菌（如黃曲霉，青霉和赭曲霉）的有毒的代謝產(chǎn)物，這些真菌可能產(chǎn)生的赭曲霉毒素Ａ是一種腎毒素，具有致癌性。經(jīng)常在人類食品和動(dòng)物飼料中被檢測(cè)到，主要存在于谷物中，日常用品中也經(jīng)常含有。赭曲霉毒素會(huì)導(dǎo)致人的巴爾干半島腎病變（ＢＥＮ）腎系統(tǒng)的瘤病變。對(duì)于動(dòng)物，它會(huì)造成豬的腎功能損傷，會(huì)造成雞和火雞生長(zhǎng)緩慢，飼料轉(zhuǎn)化率低，腎病甚至死亡，減少蛋產(chǎn)量和蛋殼質(zhì)量。
赭曲霉毒素Ａ總量試劑盒是利用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)谷物，咖啡或動(dòng)物飼料中含有的其他物質(zhì)中所含的赭曲霉毒素Ａ總量。試驗(yàn)方法的原理赭曲霉毒素Ａ總量試劑盒的工作原理是酶聯(lián)免疫吸附分析法。一種赭曲霉毒素的特異性抗體包被在聚苯乙烯酶標(biāo)板的小孔中，用70%的甲醇將樣品中的赭曲霉毒素萃取后，將含有赭曲霉毒素的萃取液或標(biāo)準(zhǔn)品和過氧化物酶標(biāo)記赭曲霉毒素加入到小孔中，此時(shí)過氧化物酶標(biāo)記赭曲霉毒素和樣品、標(biāo)準(zhǔn)品中游離的赭曲霉毒素競(jìng)爭(zhēng)性地與包被在板上的抗體結(jié)合。在室溫下溫育清洗后，加入底物溶液，室溫孵育一段時(shí)間，發(fā)生藍(lán)色反應(yīng)。加入停止液，終止顏色反應(yīng)，藍(lán)色變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)定光密度值（OD），樣品中赭曲霉毒素Ａ總量的濃度與OD值成反比關(guān)系。 試劑盒中所包含的試劑：1．酶標(biāo)板1塊：包括12條，每條含有8個(gè)小孔，每個(gè)孔中均包被有鼠抗赭曲霉毒素的單克隆抗體．2．稀釋板1塊：沒有包被的12條8孔板。3． 6瓶赭曲霉毒素Ａ標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為：0, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0 ng/ml（ppb），每瓶1.5 ml．4．酶標(biāo)記物（過氧化物酶標(biāo)記的赭曲霉毒素Ａ）：25 ml。5．底物溶液（TMB）：15 ml。6．停止溶液(0.5 M H2SO4)：15 ml。 需要的其它試劑和設(shè)備（試劑盒沒有提供）：粉碎機(jī)：能將樣品磨至速溶咖啡顆粒大小。萃取容器：至少125ml。天平：20克以上的稱量范圍。100ml量筒。每個(gè)樣品70ml試劑級(jí)甲醇。30ml去離子水或蒸餾水。濾紙：Whatman 1 型或同類型濾紙。過濾漏斗。l。ml和200m移液器和吸頭：100計(jì)時(shí)器。洗瓶。吸水紙。酶標(biāo)儀（450nm）。 注意事項(xiàng)：為了保證測(cè)定結(jié)果的可靠性，請(qǐng)按照下列良好實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范（GLP）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)1．在進(jìn)行分析操作之前，請(qǐng)將所有的試劑回溫到室溫(19-27°C)。2．使用前，試劑儲(chǔ)存在2 - 8°C，不要冰凍。3．未用完的試劑不要倒回原瓶中，按照實(shí)驗(yàn)所需的量取用試劑。4．實(shí)驗(yàn)過程中注意保證溫度和反應(yīng)時(shí)間。5．所有的試劑在使用前，通過翻轉(zhuǎn)搖動(dòng)進(jìn)行充分的混合，但不要引起泡沐的產(chǎn)生。6．一旦實(shí)驗(yàn)開始，所有的操作步驟應(yīng)該在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)完成，不要中斷或者超時(shí)。7．所有的試劑瓶操作完成后立即蓋好蓋，不要將不同試劑瓶的蓋混用。8．每個(gè)樣品只能用自己的吸頭，不能混用，防止交叉污染。9．所有的樣品和標(biāo)準(zhǔn)物必須同時(shí)使用，所有的試驗(yàn)條件保持一致。10．不要將不同批次的試劑混用。11．不要使用過期的試劑。12．要經(jīng)常的檢查酶標(biāo)儀和微量移液器的精度和準(zhǔn)確度。
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