移液槍是實(shí)驗(yàn)操作上不可缺少的工具，對(duì)于頂尖高手而言，重要的就是實(shí)驗(yàn)的誤差最小，重復(fù)再現(xiàn)性好，那就要注意正確移液槍使用。
移液槍的分類和工作原理
氣體活塞式移液槍
工作原理：通過(guò)彈簧的伸縮運(yùn)動(dòng)，推動(dòng)活塞，排除部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動(dòng)空氣排除液體。
塞式移液槍
工作原理：通過(guò)分液管或吸頭內(nèi)活塞的連續(xù)運(yùn)動(dòng)移取和打出液體，活塞和液體直接接觸，沒(méi)有空氣柱，適用于密度、黏度與水不同的液體，如易揮發(fā)性溶液、粘稠液體等。
移液槍使用訣竅
氣體活塞式移液槍
1影響移液槍精度因素
(1)溫度：室溫低時(shí)，手溫較高，使得空氣膨脹，吸入冷溶液時(shí)往往發(fā)生誤差。
(2)氣密性：吸頭和槍體的結(jié)合部，以及槍內(nèi)柱體之間的長(zhǎng)期磨損，造成誤差。
(3)吸速：容易造成吸頭內(nèi)氣泡產(chǎn)生，而且會(huì)污染槍頭。
(4)試劑的揮發(fā)：吸揮發(fā)性高的試劑時(shí)，蒸汽進(jìn)入槍頭，內(nèi)壓增高，結(jié)果在壓出液體時(shí)，壓力變大，而產(chǎn)生誤差。解決辦法：反復(fù)抽吸4-5次就可改善。
2具體使用方法
更換tip法：最精確。
(1)調(diào)節(jié)旋鈕到所需刻度位置，訣竅：首先可略超過(guò)一些，再回旋至刻度。注意禁止超過(guò)最大刻度，避免人為誤差。
(2)插上tip:無(wú)菌操作時(shí)，要注意動(dòng)作迅速正確，不能用手碰tip，動(dòng)作的力度要保持一致，禁止廢動(dòng)作。普通操作時(shí)，可用拇指食指上緊，但手不能碰tip尖端處。
(3)指壓到第一段，tip尖端接觸試劑。白色tip進(jìn)到液面1 mm一下，黃色吸頭 2-3 mm，藍(lán)色吸頭2-4 mm，避免液壓的影響造成的誤差。
(4)緩慢吸試劑，禁止速度過(guò)快，液體進(jìn)入槍頭。
(5)移出吸頭后，先在容器內(nèi)壁輕輕靠住，使吸頭外壁液體流下。
(6)將吸頭貼在目標(biāo)容器內(nèi)壁，輕輕按到第一段，壓出液體。
(7)吸頭尖端在容器內(nèi)壁略上滑動(dòng)，保留尖端少量液體，移出目標(biāo)容器，手指卸掉吸頭，注意不要使試劑濺出。
一只吸頭分注法：不適用于揮發(fā)性，有毒性試劑。
(1)同上述A-D，移出液面后，先緩慢按到第一段，在用力按到第二段，將試劑全壓出。
(2)同上述C，緩慢吸出液體。
(3)在目標(biāo)容器液體上空，壓出試劑到第二段，注意壓的力度要和A相同，還應(yīng)注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段，可重復(fù)上述操作。達(dá)到目標(biāo)容器原有液體不污染吸頭的目的。
轉(zhuǎn)移數(shù)ul的貴重試劑時(shí)的方法：
(1)同上述A-D，移出液面后，在容器內(nèi)壁輕按幾下，使外壁液體流下。白色吸頭進(jìn)到液面1 mm以下，這最重要。
(2)tip尖端浸入目標(biāo)容器的液面下，緩慢壓到第一段。
(3)松開(kāi)，返回到第一段，重新吸入液體，反復(fù)4-5次，，洗凈吸頭內(nèi)壁液體。
(4)將吸頭尖端移出液面，在內(nèi)壁輕輕靠住，壓出液體到第二段。
移液槍使用注意事項(xiàng)，要注意以下幾點(diǎn)：
1. 正確選擇移液槍與吸頭組合量程
空氣柱的體積越小，誤差越低。
2. 吸頭的浸沒(méi)深度
吸頭盡量浸沒(méi)得淺一些，防止液體殘留在吸頭表面，但是同時(shí)要浸沒(méi)得足夠深防止吸取空氣。
3. 垂直吸取液體
移液時(shí)角度不同，液體壓力也會(huì)改變。
4. 預(yù)潤(rùn)濕
通過(guò)預(yù)潤(rùn)濕，使得空氣柱充滿飽和的液體分子，至少預(yù)潤(rùn)濕3次，使得空氣柱里的液體分子達(dá)到飽和。
5. 正確的放液操作
放液時(shí)，吸頭尖靠在容器內(nèi)壁，完全打出，排出最后的液滴;體積低于10ul直接放液到容器底部。
6. 緩慢、勻速的吸放液體，保證結(jié)果的精確性。
移液六部曲
1. 裝吸頭
移液器套柄用力下壓，需要時(shí)小幅度旋轉(zhuǎn)即可。
錯(cuò)誤操作：用力敲擊吸頭。此方法會(huì)帶來(lái)吸頭損壞甚至移液器套柄磨損，從而影響其密封性。
2. 量程設(shè)定
操作之前請(qǐng)先選擇正確的移液器，移液器可在10-100%量程范圍內(nèi)操作，但在10%量程處操作對(duì)于移液技巧要求高，故推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。
量程調(diào)節(jié)：當(dāng)由小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí)，朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過(guò)所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當(dāng)由大量程調(diào)節(jié)至小量程時(shí)，直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。
3. 潤(rùn)洗
用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次，潤(rùn)洗為以后每次吸液提供相同的接觸面，保證操作的一致性。
注意：高溫或者低溫液體請(qǐng)不要潤(rùn)洗!
4. 吸頭浸入角度
吸液時(shí)盡量保持垂直狀態(tài)，傾斜角度不能超過(guò)20°。
5. 吸頭浸入深度：0.1-10ul:1-2mm、10-200ul:2-3mm、200-2000ul:3-6mm、over2000ul：6-10mm。
6. 吸頭浸入時(shí)間
吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開(kāi)，這對(duì)于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
7. 吸液速度
勻速連貫移液，控制好移液速度，太快會(huì)造成噴液，液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部，污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先將活塞按至第一檔排液，略作停頓后按至第二檔進(jìn)行吹液。
排液四種方式：沿內(nèi)壁、在液面以上、在液體表面、液面下。
9. 手溫
移液器不宜長(zhǎng)時(shí)間握在手里，不用時(shí)最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。
移液槍的維護(hù)保養(yǎng)
一
密封性檢查
1.儀器測(cè)漏
2.簡(jiǎn)單目測(cè)法
1)200uL及以下的移液器，吸液后將吸頭浸入液面1-2mm，靜待20秒，觀察吸頭內(nèi)部液面是否下降。
2)1000uL以上的移液器，吸液后將吸頭移出液面，朝下垂直靜置15-20秒，觀察是否有液體下滴。
二
移液器的清洗方式
外部清潔：
日常清潔劑(專業(yè)清洗劑，肥皂液，洗潔精等)擦洗，然后用純水淋洗，晾干即可 。
內(nèi)部清潔：
1)下半部分拆卸下來(lái)。
2)塑料部件(套柄等)采用與外部清潔一致的方式即可。
3)活塞清潔可用純水(或先用異丙醇沖洗再用純水洗凈)，晾干， 然后在活塞表面用棉簽涂上一層薄薄的硅酮油脂。
注：移液器主體密封部分，大多是免維護(hù)的，不能輕易拆卸。
二
移液器的故障分析解決
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移液槍的分類和工作原理
氣體活塞式移液槍
工作原理：通過(guò)彈簧的伸縮運(yùn)動(dòng)，推動(dòng)活塞，排除部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動(dòng)空氣排除液體。
塞式移液槍
工作原理：通過(guò)分液管或吸頭內(nèi)活塞的連續(xù)運(yùn)動(dòng)移取和打出液體，活塞和液體直接接觸，沒(méi)有空氣柱，適用于密度、黏度與水不同的液體，如易揮發(fā)性溶液、粘稠液體等。
移液槍使用訣竅
氣體活塞式移液槍
1影響移液槍精度因素
(1)溫度：室溫低時(shí)，手溫較高，使得空氣膨脹，吸入冷溶液時(shí)往往發(fā)生誤差。
(2)氣密性：吸頭和槍體的結(jié)合部，以及槍內(nèi)柱體之間的長(zhǎng)期磨損，造成誤差。
(3)吸速：容易造成吸頭內(nèi)氣泡產(chǎn)生，而且會(huì)污染槍頭。
(4)試劑的揮發(fā)：吸揮發(fā)性高的試劑時(shí)，蒸汽進(jìn)入槍頭，內(nèi)壓增高，結(jié)果在壓出液體時(shí)，壓力變大，而產(chǎn)生誤差。解決辦法：反復(fù)抽吸4-5次就可改善。
2具體使用方法
更換tip法：最精確。
(1)調(diào)節(jié)旋鈕到所需刻度位置，訣竅：首先可略超過(guò)一些，再回旋至刻度。注意禁止超過(guò)最大刻度，避免人為誤差。
(2)插上tip:無(wú)菌操作時(shí)，要注意動(dòng)作迅速正確，不能用手碰tip，動(dòng)作的力度要保持一致，禁止廢動(dòng)作。普通操作時(shí)，可用拇指食指上緊，但手不能碰tip尖端處。
(3)指壓到第一段，tip尖端接觸試劑。白色tip進(jìn)到液面1 mm一下，黃色吸頭 2-3 mm，藍(lán)色吸頭2-4 mm，避免液壓的影響造成的誤差。
(4)緩慢吸試劑，禁止速度過(guò)快，液體進(jìn)入槍頭。
(5)移出吸頭后，先在容器內(nèi)壁輕輕靠住，使吸頭外壁液體流下。
(6)將吸頭貼在目標(biāo)容器內(nèi)壁，輕輕按到第一段，壓出液體。
(7)吸頭尖端在容器內(nèi)壁略上滑動(dòng)，保留尖端少量液體，移出目標(biāo)容器，手指卸掉吸頭，注意不要使試劑濺出。
一只吸頭分注法：不適用于揮發(fā)性，有毒性試劑。
(1)同上述A-D，移出液面后，先緩慢按到第一段，在用力按到第二段，將試劑全壓出。
(2)同上述C，緩慢吸出液體。
(3)在目標(biāo)容器液體上空，壓出試劑到第二段，注意壓的力度要和A相同，還應(yīng)注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段，可重復(fù)上述操作。達(dá)到目標(biāo)容器原有液體不污染吸頭的目的。
轉(zhuǎn)移數(shù)ul的貴重試劑時(shí)的方法：
(1)同上述A-D，移出液面后，在容器內(nèi)壁輕按幾下，使外壁液體流下。白色吸頭進(jìn)到液面1 mm以下，這最重要。
(2)tip尖端浸入目標(biāo)容器的液面下，緩慢壓到第一段。
(3)松開(kāi)，返回到第一段，重新吸入液體，反復(fù)4-5次，，洗凈吸頭內(nèi)壁液體。
(4)將吸頭尖端移出液面，在內(nèi)壁輕輕靠住，壓出液體到第二段。
移液槍使用注意事項(xiàng)，要注意以下幾點(diǎn)：
1. 正確選擇移液槍與吸頭組合量程
空氣柱的體積越小，誤差越低。
2. 吸頭的浸沒(méi)深度
吸頭盡量浸沒(méi)得淺一些，防止液體殘留在吸頭表面，但是同時(shí)要浸沒(méi)得足夠深防止吸取空氣。
3. 垂直吸取液體
移液時(shí)角度不同，液體壓力也會(huì)改變。
4. 預(yù)潤(rùn)濕
通過(guò)預(yù)潤(rùn)濕，使得空氣柱充滿飽和的液體分子，至少預(yù)潤(rùn)濕3次，使得空氣柱里的液體分子達(dá)到飽和。
5. 正確的放液操作
放液時(shí)，吸頭尖靠在容器內(nèi)壁，完全打出，排出最后的液滴;體積低于10ul直接放液到容器底部。
6. 緩慢、勻速的吸放液體，保證結(jié)果的精確性。
移液六部曲
1. 裝吸頭
移液器套柄用力下壓，需要時(shí)小幅度旋轉(zhuǎn)即可。
錯(cuò)誤操作：用力敲擊吸頭。此方法會(huì)帶來(lái)吸頭損壞甚至移液器套柄磨損，從而影響其密封性。
2. 量程設(shè)定
操作之前請(qǐng)先選擇正確的移液器，移液器可在10-100%量程范圍內(nèi)操作，但在10%量程處操作對(duì)于移液技巧要求高，故推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。
量程調(diào)節(jié)：當(dāng)由小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí)，朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過(guò)所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當(dāng)由大量程調(diào)節(jié)至小量程時(shí)，直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。
3. 潤(rùn)洗
用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次，潤(rùn)洗為以后每次吸液提供相同的接觸面，保證操作的一致性。
注意：高溫或者低溫液體請(qǐng)不要潤(rùn)洗!
4. 吸頭浸入角度
吸液時(shí)盡量保持垂直狀態(tài)，傾斜角度不能超過(guò)20°。
5. 吸頭浸入深度：0.1-10ul:1-2mm、10-200ul:2-3mm、200-2000ul:3-6mm、over2000ul：6-10mm。
6. 吸頭浸入時(shí)間
吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開(kāi)，這對(duì)于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
7. 吸液速度
勻速連貫移液，控制好移液速度，太快會(huì)造成噴液，液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部，污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先將活塞按至第一檔排液，略作停頓后按至第二檔進(jìn)行吹液。
排液四種方式：沿內(nèi)壁、在液面以上、在液體表面、液面下。
9. 手溫
移液器不宜長(zhǎng)時(shí)間握在手里，不用時(shí)最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。
移液槍的維護(hù)保養(yǎng)
一
密封性檢查
1.儀器測(cè)漏
2.簡(jiǎn)單目測(cè)法
1)200uL及以下的移液器，吸液后將吸頭浸入液面1-2mm，靜待20秒，觀察吸頭內(nèi)部液面是否下降。
2)1000uL以上的移液器，吸液后將吸頭移出液面，朝下垂直靜置15-20秒，觀察是否有液體下滴。
二
移液器的清洗方式
外部清潔：
日常清潔劑(專業(yè)清洗劑，肥皂液，洗潔精等)擦洗，然后用純水淋洗，晾干即可 。
內(nèi)部清潔：
1)下半部分拆卸下來(lái)。
2)塑料部件(套柄等)采用與外部清潔一致的方式即可。
3)活塞清潔可用純水(或先用異丙醇沖洗再用純水洗凈)，晾干， 然后在活塞表面用棉簽涂上一層薄薄的硅酮油脂。
注：移液器主體密封部分，大多是免維護(hù)的，不能輕易拆卸。
二
移液器的故障分析解決
| 問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方法 |
| 吸頭漏液或分液體積不準(zhǔn)確 | 吸頭松脫或吸頭不匹配 | 插緊吸頭；更換匹配的吸頭 |
| 移取粘稠、易揮發(fā)性或與水密度有明顯差異的液體 | 預(yù)潤(rùn)濕吸頭數(shù)次 | |
| 移液過(guò)快 | 緩慢移動(dòng)控制按鈕，慢吸慢放 | |
| 吸頭離開(kāi)液面過(guò)快 | 在液面下停留3秒鐘，再緩慢移出吸頭 | |
| 活塞被污染或損壞 | 清潔或更換活塞 | |
| 移液槍吸嘴損壞 | 更換移液槍下半部分零件或通道 | |
| 控制按鈕移動(dòng)困難，發(fā)澀。 | 活塞被污染 密封圈污染 移液槍堵塞 | 清潔移液槍下半部分 更換過(guò)濾芯 |
| 安裝吸頭時(shí)吸嘴無(wú)彈性伸縮 | 鎖定環(huán)取消了彈簧加載 | 取下鎖定環(huán) |
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