先區(qū)分幾個小概念
保留時間(T)：
從進(jìn)樣開始到某個組分的色譜頂點的時間間隔稱為該組分的保留時間。即從進(jìn)樣到柱后某組分出現(xiàn)濃度極大時的時間間隔。
死時間(t)：
分配系數(shù)為0的組分的保留時間稱為死時間。通常將空氣或者甲烷視為此種組分，用來測定死時間。
調(diào)整保留時間（t）：
某組分由于溶解（或者吸附）于固定相，比不溶解（或者不吸附）的組分在柱中多停留的時間稱為調(diào)整保留時間；
調(diào)整保留時間=保留時間—死時間；（Vd）。
※在實驗室條件下（溫度，固定相等）一定時，調(diào)整保留時間僅決定于組分的性質(zhì)，因此調(diào)整保留時間是定性的基本參數(shù)。
液相色譜中保留時間的波動
與哪些因素有關(guān)
一般而言，與如下因素有關(guān)：
1 操作因素；
2 色譜柱的質(zhì)量；
3 儀器系統(tǒng)，尤其是輸液泵的性能。
氣相色譜儀保留時間不重復(fù)故障排除方法
引起保留時間不重復(fù)的最可能原因只有兩個:
柱溫不穩(wěn)定；
流速有變化。
※檢測器的故障不會造成保留時間不重復(fù),造成保留時間不重復(fù)的其它原因有進(jìn)樣技術(shù)不佳，進(jìn)樣量過大及柱損傷等。
排除保留時間不重復(fù)故障的步驟如下：
（1）重復(fù)進(jìn)樣檢查：
為了進(jìn)一步證實保留時間不重復(fù)故障，應(yīng)首先檢查進(jìn)樣的重復(fù)性。在重復(fù)進(jìn)樣時最好由一人獨立操作，這樣能較好地解決進(jìn)樣時間的重復(fù)性問題；如果重復(fù)進(jìn)樣后保留時間仍然不能重復(fù)，則應(yīng)轉(zhuǎn)入下一步。
（2）溫控精度及程序升溫重復(fù)性檢查：
恒溫分析時應(yīng)首先檢查柱室溫度是否穩(wěn)定在原分析操作所要求的設(shè)定值上。
必要時要檢查柱室溫度的穩(wěn)定性，如,設(shè)定值及實際柱溫與原分析條件有偏差，應(yīng)以原分析條件為準(zhǔn)；
如果柱室溫度在運行中有突然跳動，應(yīng)進(jìn)行溫度控制故障檢查與排除。
在應(yīng)用程序升溫的場合下，要檢查程序升溫過程起始、終止柱溫及升溫速率與原分析條件是否一致。
在檢查時應(yīng)注意，每次重新升溫時，是否有足夠的時間使起始溫度保持一致，特別是起始溫度很接近室溫時，更應(yīng)如此。
程序升溫的升溫速率可以通過先測定升溫中始、終兩點間所需時間值，然后用終溫與始溫之差除以該時間值而加以驗證。
程序升溫中還有一種情況不易為操作者所發(fā)現(xiàn)：那就是在升溫過程中溫度的變化很不均勻，忽快忽慢，但總的升溫速率卻看不出變化。
對此現(xiàn)象可采取記錄程序升溫曲線而加以比較。
如無自動記錄方式可用手工法逐段加以記錄，程序升溫結(jié)束時再逐段加以對照，即可。
（3）載氣流速檢查：
載氣流速的改變是引起保留時間不重復(fù)的另一個重要原因。
可用皂膜流量計測定柱后或檢測器之后的實際流速加以證實。
對于恒溫分析來說，主要檢測實測值與預(yù)定值之間的偏差，必要時重新調(diào)整設(shè)定值使流速達(dá)到預(yù)定值要求。
對于程序升溫來說，必須檢查溫度處于始、終兩點時載氣流速是否有較大的變化。如果在始、終兩點間流速之差超過2mL/s（當(dāng)柱內(nèi)徑為4mm時）即認(rèn)為穩(wěn)流特性不好，這時需進(jìn)一步檢查系統(tǒng)是否漏氣，穩(wěn)流閥、穩(wěn)壓閥工作壓力是否合乎要求。
系統(tǒng)漏氣不論對程序升溫色譜，還是恒溫色譜說來都是產(chǎn)生保留值不重復(fù)的一個不應(yīng)忽略的原因。
在系統(tǒng)漏氣中進(jìn)樣口隔墊的漏氣是經(jīng)常產(chǎn)生的，在高溫操作下頻繁進(jìn)樣時要注意及時更換。
（4）色譜柱檢查：
如果在氣密性及載氣流速方面均無異常，就應(yīng)懷疑是色譜柱本身出了問題，對色譜柱進(jìn)行檢查。
首先注意色譜峰形有否拖尾，如拖尾則應(yīng)減少進(jìn)樣量或稀釋樣品濃度，以免色譜柱過載。
如減少進(jìn)樣量后保留值重復(fù)性提高，則說明原柱固定相有少量流失或充填欠佳；此時原色譜柱還仍能使用。
如果上述方法也無效，則說明色譜柱已發(fā)生損壞，必須更換新柱子。
怎樣解決液相色譜保留時間的漂移？為什么會漂移？
保留時間飄移可能的原因有：
1 柱子沒有達(dá)到平衡；
解決：
平衡更長的時間來解決。
2 實驗環(huán)境溫度發(fā)生變化；保留時間和溫度有很大的關(guān)系，一般溫度高，出峰快。
解決：
這里的溫度不僅指柱溫，其實還包括流動相溫度。柱溫一般都有規(guī)定，用柱溫箱就可以平衡了，但是流動相溫度沒有規(guī)定，很多人不知道也要保持不變。在空調(diào)房里做，保持住室溫不變，一般會好很多。
3 流動相比例發(fā)生變化；
解決：
配置時盡量混合均勻；配置時盡量保證比例沒有偏離；使用時盡量保證導(dǎo)管接口處不揮發(fā)泄漏；長時間不用的要密封，最好廢棄不用。
4 長期使用后柱子損耗；
解決：
重新，再生柱子，或更換新的。
你要如何鎖定保留時間？
所謂保留時間鎖定，就是使特定化合物的保留時間在不同儀器、不同色譜柱（但標(biāo)稱固定相和相比相同）之間保持不變。為了討論這一技術(shù)的基本原理，要從影響保留時間重現(xiàn)性的因素說起！
決定保留時間的因素都有啥？
化合物的性質(zhì)、固定液的性質(zhì)和操作條件；
如果前兩個因素不變（對于特定的化合物和GC儀器系統(tǒng)，這當(dāng)然是成立的）；
只有操作條件會變，即，載氣流速、柱溫、毛細(xì)管柱規(guī)格和檢測器類型等。
載氣控制：
對于同種載氣來說，壓力和流速是影響保留時間的參數(shù)；
不同廠家的壓力表和流量計的制造精度有所不同，故當(dāng)不同儀器的壓力和流量顯示完全一致時，柱內(nèi)流量也不盡相同；
現(xiàn)在有了EPC，這一問題基本得到了解決；
雖然同一廠家制造的EPC不可能每項都嚴(yán)格一致，但差異微小，通過壓力的自動調(diào)節(jié)完全可以補償這一差異。
溫度控制：
保留時間對溫度極為敏感，過去采用水銀溫度計測量柱溫時，重現(xiàn)性顯然有問題?，F(xiàn)在都用熱敏元件與電子線路來控制溫度，精度大為提高。不同儀器間溫度重現(xiàn)性令人滿意。即使有0.5℃的溫度差異，我們?nèi)阅芡ㄟ^調(diào)節(jié)柱前壓的辦法來使保留時間達(dá)到重現(xiàn)。
色譜柱規(guī)格：
一、不同廠商的色譜柱，盡管標(biāo)稱規(guī)格一致，但難免有內(nèi)徑的不均勻、固定液膜厚的變化、以及柱長的不精確，這些都會造成保留時間的波動。
二、同一根色譜柱在使用過程中會發(fā)生變化，比如，重新安裝或因柱污染而截去1～2cm后，若其他操作條件不變，保留時間就不能重現(xiàn)了。
目前，同一廠商的色譜柱制造重現(xiàn)性已相當(dāng)高，而不同廠家的色譜柱尚不能完全重現(xiàn)，尤其是極性柱。但我們?nèi)绻捎猛粡S家的色譜柱，就可基本解決這一問題。至于色譜柱長度的變化，可以通過調(diào)節(jié)柱前壓來補償。
檢測器類型：
常規(guī)檢測器：
常壓下工作；
MS：
高真空下工作；
AED：
高于大氣壓（如，10kPa）下工作。這樣，當(dāng)比較常規(guī)檢測器和MS或AED所得結(jié)果時，即使柱前壓嚴(yán)格一致，柱壓降也不同，保留時間就不能重現(xiàn)。采用EPC時，就很容易通過調(diào)節(jié)壓力使柱壓降保持相同。
通過上述分析我們可以得出結(jié)論，只要儀器的載氣和溫度控制精度足夠高，只要色譜柱標(biāo)稱規(guī)格一致，就可以通過調(diào)節(jié)柱前壓的方法來補償操作參數(shù)的微小變化，從而實現(xiàn)保留時間的重現(xiàn)，這就是RTL的基礎(chǔ)。
小結(jié)
保持保留時間的重復(fù)性是重中之重！同時，也要盡可能避免保留時間的漂移！關(guān)注保留時間的穩(wěn)定性也能反映流動相、檢測器等的正常情況！
