portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">portant; word-wrap: break-word !important;">腸埃希氏菌(E. coli)portant; word-wrap: break-word !important;">通常稱為大腸桿菌portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">,是portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">Escherichportant; word-wrap: break-word !important;">在portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 'Times New Roman';">1885portant; word-wrap: break-word !important;">年發(fā)現(xiàn)的portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">,在相當(dāng)長的一段時間內(nèi),一直被當(dāng)作正常腸道菌群的組成部分,是非致病性的。直到portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">20portant; word-wrap: break-word !important;">世紀(jì)中葉portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">,才認(rèn)識到一些特殊血清型的大腸桿菌對人和動物有病原性,尤其對嬰兒和幼畜、禽。常引起嚴(yán)重腹瀉和敗血癥,根據(jù)不同的生物學(xué)特性將致病性大腸桿菌分為portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">5portant; word-wrap: break-word !important;">類portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">,致病性大腸桿菌portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">(EPEC)portant; word-wrap: break-word !important;">、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 'Times New Roman';">(ETEC)portant; word-wrap: break-word !important;">、腸侵襲性大腸桿菌portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 'Times New Roman';">(EIEC)portant; word-wrap: break-word !important;">、腸出血性大腸桿菌portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 'Times New Roman';">(EHEC)portant; word-wrap: break-word !important;">、腸黏附性大腸桿菌portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 'Times New Roman';">(EAEC)portant; word-wrap: break-word !important;">。大腸桿菌屬于細(xì)菌。
portant; word-wrap: break-word !important; font-size: 18px;">大腸桿菌的結(jié)構(gòu)
portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">大腸桿菌是人和許多動物腸道中最主要且數(shù)量最多的一種細(xì)菌portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">,周身鞭毛,能運(yùn)動,無芽孢,是原核生物具有由肽聚糖組成的細(xì)胞,只含有核糖體簡單的細(xì)胞器,沒有細(xì)胞核但有擬核,細(xì)胞質(zhì)中的質(zhì)粒常用作基因工程中的運(yùn)載體。
portant; word-wrap: break-word !important;">portant; word-wrap: break-word !important;">大腸桿菌與人類portant; word-wrap: break-word !important;">portant; word-wrap: break-word !important;">的portant; word-wrap: break-word !important; font-size: 14px;">portant; word-wrap: break-word !important; color: rgb(137, 178, 59); font-size: 16px;">關(guān)系
portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">portant; word-wrap: break-word !important;">大腸桿菌一般多不致病,為人和動物腸道中的常居菌,能發(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,是人和動物腸道中的正常棲居菌,嬰兒出生后即隨哺乳進(jìn)入腸道與人終身相伴,其代謝活動能抑制腸道內(nèi)分解蛋白質(zhì)代謝的有害物質(zhì)和抑制微生物的生長,還能合成維生素B和K,以及有殺菌作用的大腸桿菌素,但在一定條件下可引起腸道的外感染某些血清型菌株的致病性強(qiáng),引起腹瀉,統(tǒng)稱致病性大腸桿菌。大腸桿菌的檢測,在培養(yǎng)基培養(yǎng)時無需添加生長因子,向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)遇大腸桿菌,菌落呈深紫色,并有金屬光澤,可鑒別大腸桿菌是否存在。雖然絕大多數(shù)大腸桿菌與人類有著良好合作,但是仍有少部分特殊類型的大腸桿菌具有相當(dāng)強(qiáng)的毒力,一旦感染,將造成嚴(yán)重疫情。其中最具代表性的就是代號為O157:H7的大腸桿菌, O157:H7感染后的主要癥狀正是出血性腹瀉,嚴(yán)重者可伴發(fā)溶血尿毒綜合征HUS,危及生命。由于O157:H7危害較大,且可經(jīng)食物和飲用水在人群中廣泛傳播,因此食品衛(wèi)生主管部門已將O157:H7列為常規(guī)檢測項(xiàng)目。 大腸桿菌O157:H7是腸出血性大腸埃希菌的主要血清型,能引起人的出血性腸炎和溶血性尿路綜合征.大腸桿菌O157:H7致病機(jī)制與其毒力島編碼的毒力因子有關(guān),這些毒力島包括染色體上的LEE島、前噬菌體上的slt基因、大質(zhì)粒上的hly、katP、espP、toxB、stcE基因.大腸桿菌O157:H7致病機(jī)理不是由單一毒力因子所決定,而是多種毒力因子共同作用的結(jié)果。
portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">portant; word-wrap: break-word !important;">傳播途徑主要有食物傳播,水傳播和接觸傳播三種,O157:H7大腸桿菌主要是通過污染食物而引起人的感染,O157:H7大腸桿菌的致病能力和對胃酸的抵抗力均較強(qiáng)對細(xì)胞的破壞性大。 動物來源的食物,如牛肉、雞肉、牛奶、奶制品等是O157:H7大腸桿菌經(jīng)食物傳播的主要因素,尤其是在動物屠宰過程中這些食物更易受到寄生在動物腸道中的細(xì)菌污染。另外蔬菜、水果等被O157:H7大腸桿菌污染也可造成大腸桿菌感染爆發(fā)。O157:H7在外環(huán)境中的生存能力較強(qiáng),引起人類感染可能并不需要在外環(huán)境中進(jìn)行增菌,除了飲用水受到污染可造成感染外,其他被污染的水體如游泳池、湖水及其他地表水等都可造成傳播。在上述三條傳播途徑中,以食物傳播為主。有人對自1982年起發(fā)生的100多起 O157:H7爆發(fā)流行的感染途徑進(jìn)行統(tǒng)計(jì),發(fā)現(xiàn)食源性的占71%,52%為牛肉制品,大部分與快餐店中的漢堡包有關(guān),14%為水果、蔬菜、5%來源于未知食品、16%為人與人接觸感染、12%為水源性感染。要避免被具有致病作用的大腸桿菌感染,其實(shí)非常簡單,大腸桿菌其實(shí)是非常脆弱的,像沸水這樣的溫度可以瞬間將其滅活,因?yàn)橥耆恍枰獙λ鼈冇腥魏慰只?。你只要把食品煮熟,不要吃生食,同時裝食品的各類用具也注意清潔,那就不可能被感染了。 生物技術(shù)中的應(yīng)用,微生物這些小小的生物,是人眼不能看到的,雖然這些微生物為我們健康帶來了一些威脅,像是當(dāng)受傷是不能及時處理傷口,會使細(xì)菌入侵我們的身體,造成創(chuàng)面感染,嚴(yán)重的會造成敗血癥,甚至?xí)鹚劳龅陌l(fā)生,但是,自發(fā)現(xiàn)微生物之后,人們將微生物進(jìn)行培養(yǎng),生產(chǎn)出了許多對人類有用的激素、藥物等。大腸桿菌也不例外,作為外源基因表達(dá)的宿主,遺傳背景清楚,技術(shù)操作簡單,培養(yǎng)條件簡單,大規(guī)模發(fā)酵經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn),成為了基因工程主要原核受體菌,此外還應(yīng)用于外源DNA克隆和擴(kuò)增,原核基因高效表達(dá),基因文庫構(gòu)建等一些生物技術(shù)方面。
portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">大腸桿菌的研究近況
portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">胰島素是一個很好的例子,起初,胰島素發(fā)現(xiàn)時并不能夠大規(guī)模的生產(chǎn),因而生產(chǎn)出來的胰島素也就有了很高的身價,由于糖尿病是由于身體不能正常吸收葡萄糖,而使得身體漸漸消瘦,而蛋白質(zhì)在消化過程中又會產(chǎn)生酸性物質(zhì),而使得糖尿病患者酸中毒,于是當(dāng)時的主要的治療手段就是饑餓治療,使得糖尿病成為了絕癥。而現(xiàn)在科學(xué)家們把人的胰島素基因送到大腸桿菌的細(xì)胞里,將編碼截短的門冬酰胺酶突變體(ansB-C),天然C肽,人IgG1鉸鏈區(qū)(hinge),額外的酸敏感二肽(DP)以及富含堿性氨基酸的8肽(KRKRKKSR)的核苷酸序列依次分別插入pET28a載體中,構(gòu)建表達(dá)載體pEDCC.在乳糖的誘導(dǎo)下,融合蛋白ansB-C-hinge-DPKRKRKKSRNGSGR-C-peptide以包涵體形式高效表達(dá).融合蛋白經(jīng)洗滌和乙醇分級沉淀純化后,通過酸水解將PKRKRKKSRNGSGR-C-peptide釋放出來.C肽N端14肽用胰蛋白酶切割,通過DE52柱與C-peptide分離.結(jié)果:構(gòu)建的表達(dá)載體pEDCC序列正確,融合蛋白經(jīng)分離純化得到了高純度的重組人源胰島素原C肽.胰島素基因和大腸桿菌的遺傳物質(zhì)相結(jié)合,人的胰島素基因在大腸桿菌的細(xì)胞里指揮著大腸桿菌生產(chǎn)出了人的胰島素。并隨著它的繁殖胰島素基因也一代代的傳了下去,后代的大腸桿菌也能生產(chǎn)胰島素了。這樣越來越多的人能夠使用胰島素來治療糖尿病了。
參考文獻(xiàn)
portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">[1]王學(xué)軍, 顧凱,曹榮月,林潔 ,吳潔 ,劉景晶.《重組人源胰島素原C肽在大腸桿菌中的克隆、表達(dá)與純化》[J]《中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào)》2006 第2期
portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">[2]周勇,綜述,萬成松.《大腸桿菌O157、H7的毒力島與毒力因子的研究進(jìn)展》[J]《微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展》 2006 第2期
portant; word-wrap: break-word !important; font-family: 宋體; font-size: 16px;">[3]卡爾·齊默《小生命--大腸桿菌解開生命奧秘》