硝基呋喃類代謝物快速檢測試劑盒北京六角體

硝基呋喃類代謝物快速檢測試劑盒

【檢測原理】 樣品中的硝基呋喃類代謝物AOZ、SEM等經(jīng)過提取后與芳香醛反應(yīng)衍生化生成腙類化合物，該類化合物與金屬離子形成的配位體在紫外燈照射下具有藍綠色熒光。依此性質(zhì)建立硝基呋喃代謝物熒光現(xiàn)場快速篩查法。硝基呋喃代謝物與新型衍生化試劑反應(yīng)速度快，生成產(chǎn)物穩(wěn)定，用反相萃取柱富集凈化，再用較少的試劑洗脫，可得到較好的濃縮和凈化。

【檢測范圍】 新鮮魚、蝦等水產(chǎn)品的肌肉組織。

【技術(shù)指標】 檢測下限1.0μg/kg。

【操作步驟】

1）提?。簻蚀_稱取已攪碎的樣品10.00 g于50mL離心管中，先后加入提取劑1及提取劑2(液體20.0mL) ，振搖/旋渦混合1min后于25℃條件下超聲15min，取出靜置；取一塊脫脂棉，塞住漏斗上頸口，加入3mL凈化劑潤洗脫脂棉。用一次性吸管吸取上清液10mL于漏斗中過濾，用50mL離心管接收濾液【保證濾液量足夠10ml，并且濾液要清亮】；

2）衍生化：取2ml激活劑完全溶解衍生化試劑3備用；

向“1”中收集的濾液中加入0.5mL衍生化試劑1(移液槍取)、0.8mL衍生化試劑2(移液槍取)，搖勻后再加入0.1mL衍生化試劑3(移液槍取)、0.5mL衍生化試劑4 (移液槍取)，搖勻后于35~40℃條件下超聲衍生化30min；冷卻至室溫待過柱；

3）凈化：取固相萃取柱一支，依次加入3mL激活劑、2mL蒸餾水激活柱子后，加入全部衍生化樣液【如果衍生化樣液有白色懸浮物，待靜置沉淀/離心后取上清液過柱】，以2～3mL/min速度過柱，棄去流出液并擠干；加入2.5mL洗滌劑棄去流出液并擠干；再加入0.6mL洗脫劑（移液槍?。┫疵?，5mL離心管收集洗脫液；

4）萃取：取6ml蒸餾水溶解萃取劑1一瓶備用（萃取劑1不能完全溶解）；

Ø 向收集的洗脫液中加入1ml萃取劑1的上清液、1mL萃取劑3，振搖30秒，靜置3min分層，   棄去下層液體；

Ø 加入1ml萃取劑2、1mL萃取劑3，劇烈振搖30秒，靜置4min分層，棄去上層；

Ø 再加入2mL萃取劑3，劇烈振搖30秒，靜置4min分層，棄去上層液體；

Ø 再加入2mL萃取劑3，劇烈振搖30秒，靜置5min分層，待觀察。

5）觀察判斷：用干凈的一次性吸管吸取0.7mL下層（注：不要取到上層）液體到點滴板的一個孔上, 加入3滴定性試劑混勻，同時用另一支吸管吸取0.7mL對照液（對照液用洗滌劑1：1稀釋）到點滴板的另一個孔上；將點滴板放入硝代速測檢測儀中對照觀察，熒光強度高于對照液的熒光強度則樣品中含有硝基呋喃代謝物大于1.0μg/kg；熒光強度低于對照液的熒光強度則樣品中硝基呋喃代謝物的含量則小于1.0μg/kg。

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