黃曲霉毒素M1酶聯(lián)免疫法ELISA 檢測(cè)試劑盒96孔

一、檢測(cè)原理

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA 方法，樣品中游離的黃曲霉毒素M1 與酶標(biāo)板上固相包被的黃曲霉毒素M1 抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體，酶標(biāo)二抗可與抗體反應(yīng)，再通過(guò)酶的專(zhuān)一性顯色劑顯色，因?yàn)槊缚梢允篃o(wú)色的顯色劑轉(zhuǎn)變成藍(lán)色，終止液的加入可以終止顯色，藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，吸收值可以在450nm 處進(jìn)行測(cè)定。顏色變化的程度反映樣品中黃曲霉毒素M1 的含量。

二、檢測(cè)范圍
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)比較，能經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)出液態(tài)奶、奶粉、酸奶、奶酪等樣本中的黃曲霉毒素M1。

樣本前處理步驟：

（一）液態(tài)奶（含生鮮奶及成品液態(tài)奶）

1、取待測(cè)樣品，3000rmp 室溫下離心10min（除去脂肪層）；

2、下層500μL 待測(cè)樣本，加入500μL 液態(tài)奶樣品稀釋液混勻2min；

3、取下層50μL 用于分析。

稀釋倍數(shù)：2

（二）酸奶

1、稱(chēng)取0.5g 待測(cè)樣品，加入500μL 酸奶樣品稀釋液，混勻2min；

2、7000rmp 室溫下離心10min

3、取下層50 μL 用于分析。

稀釋倍數(shù)：2

（三）奶粉

1、稱(chēng)取1 g 樣品，加入6mL 乙腈，混勻2min；

2、3000rpm 室溫下離心，10min；取上清3ml，50℃氮吹；

3、加入0.5ml 濃縮樣品稀釋液復(fù)溶，再加入0.5ml 正己烷混勻2min，3000rpm 室溫下離心，5min；     4、取下層50μL 用于分析。

（四）奶酪

1、取1g 研磨后的奶酪，加入6ml 甲醇，7000rpm 室溫下

離心，5min；

2、取下層2ml，60℃氮吹；

3、加入1ml 石油醚，再加入2ml 樣品提取液，混勻2min；

4、5000rpm 室溫下離心，5min；

5、取下層50 μL 用于分析。

稀釋倍數(shù)：6

七、酶聯(lián)免疫檢測(cè)步驟

測(cè)定前須知：

1、 使用之前將所有試劑和需用微孔板回升至室溫。

2、 使用之后立即將所有試劑放回2~8 ℃。

3、 在使用中不要讓微孔干燥。

4、 在ELISA 分析中的重復(fù)性，很大程度上取決于洗板的一致性，正確的洗板操作是ELISA 測(cè)定程序中的要點(diǎn)。

5、 在所有恒溫孵育過(guò)程中，避免光線照射，用蓋板膜蓋住微孔板。三、交叉反應(yīng)率:     黃曲霉毒素M1………………………  
    

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