賽默飛Orbitrap Eclipse三合一超高分辨質(zhì)譜儀從根本上提高了定量蛋白質(zhì)組分析的靈敏度、速度和準(zhǔn)確性,以及全面定義蛋白質(zhì)形式和蛋白質(zhì)復(fù)合物的能力。HMRn(高質(zhì)量范圍MSn)、PTCR(質(zhì)子轉(zhuǎn)移電荷減少)和RTS(實(shí)時(shí)搜索)的加入是專門設(shè)計(jì)的功能,極大地提高了質(zhì)譜識別重要生物分子的能力,并在結(jié)構(gòu)上以的詳細(xì)程度對它們進(jìn)行研究。在保持Orbitrap Fusion Lumos三合一質(zhì)譜性能的基礎(chǔ)上,Eclipse提升了如下主要性能:(1)HMRn(High Mass Range MSn,高質(zhì)量范圍MSn):MSn多級質(zhì)譜的分子量范圍可達(dá)到8,000 Da,包括擴(kuò)展Orbitrap的m/z 至8,000和LTQ分離母離子m/z至8,000,并具有MSn(n=1~10)能力。比如使用HMRn做NativeOmics,可以用多級質(zhì)譜鑒定膜蛋白的配體,更好理解蛋白的相互作用。(2)PTCR(Proton Transfer Charge Reduction ,質(zhì)子轉(zhuǎn)移電荷減少)離子源:全氟菲烷(PFPP) 離子,用于隨后雙級線性離子阱中的氣相離子反應(yīng),利用質(zhì)子轉(zhuǎn)移減少母離子或子離子的多電荷態(tài),使多電荷譜圖的質(zhì)量提高、Top-down組學(xué)的解析更容易,可以更好地揭示蛋白隱藏的特征。(3)RTS(Real-time search實(shí)時(shí)搜索)算法軟件:提供了強(qiáng)大的數(shù)據(jù)庫功能,當(dāng)已鑒定的蛋白和初始數(shù)據(jù)庫匹配一致就標(biāo)記為不再進(jìn)行MS3,因此可有效縮短時(shí)間,提升1倍通量。在選擇已確定的母離子進(jìn)行 SPS MS3 定量時(shí),可提高定量準(zhǔn)確性和TMT實(shí)驗(yàn)的蛋白質(zhì)組覆蓋率。(4)雙曲面QR5 分段四極桿:增長為25 cm,并擴(kuò)大直徑,提升離子傳輸效率,并可有限選擇分離0.4 Da的母離子。(5)具有50萬分辨率,擴(kuò)展選項(xiàng)后可達(dá)到100萬分辨率。
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