這些細(xì)則要遵守
1.實(shí)驗(yàn)室參加實(shí)驗(yàn)的人員，必須整潔、文明、肅靜。
2.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的所有人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度，實(shí)驗(yàn)室為無(wú)煙實(shí)驗(yàn)室，嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙，不得吃口香糖，不得隨地吐痰和亂扔紙張。
3.參加實(shí)驗(yàn)的人員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要注意保持室內(nèi)衛(wèi)生及良好的實(shí)驗(yàn)秩序。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，必須及時(shí)做好清潔整理工作，實(shí)驗(yàn)人員必須將工作臺(tái)、儀器設(shè)備、器皿等清潔干凈，并將儀器設(shè)備和器皿按規(guī)定歸類放好，不能任意搬動(dòng)和堆放。所有實(shí)驗(yàn)所產(chǎn)生的廢物放入廢物箱內(nèi)，并及時(shí)處理，清理好現(xiàn)場(chǎng)。
4.在每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)人員必須對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃。
5.實(shí)驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)安排日常的衛(wèi)生清掃、儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)工作。實(shí)驗(yàn)室成員有參加本室清掃及維護(hù)保養(yǎng)儀器設(shè)備的義務(wù)。
6.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)各種設(shè)備、物品擺放要合理、整齊，與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品禁止存放在實(shí)驗(yàn)室。
7.實(shí)驗(yàn)室為保持室內(nèi)地面、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、設(shè)備和工作環(huán)境的干凈整潔，必須堅(jiān)持每天一小掃，每周一大掃的衛(wèi)生制度，每年徹底清掃1~2次。
8.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的儀器設(shè)備、各人實(shí)驗(yàn)臺(tái)架、凳和各種設(shè)施擺放整齊，并經(jīng)常擦拭，保持無(wú)污漬、無(wú)灰塵。
9.衛(wèi)生責(zé)任人應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室桌面、地面及時(shí)打掃。注意保持室內(nèi)場(chǎng)地和儀器設(shè)備的整潔衛(wèi)生。
10.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)雜物要清理干凈，有機(jī)溶劑、腐蝕性液體的廢液必須盛于廢液桶內(nèi)，貼上標(biāo)簽，統(tǒng)一回收處理。
11.保持室內(nèi)地面無(wú)灰塵、無(wú)積水、無(wú)紙屑等垃圾。
12.實(shí)驗(yàn)室整體布局須合理有序，地面、門(mén)窗等管道線路和開(kāi)關(guān)板上無(wú)積灰與蛛網(wǎng)。
13.下班前必須搞好清潔衛(wèi)生，關(guān)好門(mén)窗、水龍頭，斷開(kāi)電源，清理場(chǎng)地。
14.不得將任何與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品帶入實(shí)驗(yàn)室。
15.對(duì)于亂擺放的實(shí)驗(yàn)藥品、儀器等，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人有權(quán)沒(méi)收或當(dāng)做廢品處理，實(shí)驗(yàn)工作人員不得有任何異議。
清洗實(shí)驗(yàn)室器皿標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
目的：去除器皿上的殘余物，使器皿可重復(fù)使用。
范圍：化學(xué)試驗(yàn)室樣品處理過(guò)程中使用的器具，如剪鉗、刀片、塑料籃、玻璃容器、陶瓷坩鍋、微波消解罐等。
樣品前處理的工具
1、用砂紙輕輕打磨掉金屬工具表面的銹漬，不要過(guò)度用力，以免磨掉保護(hù)涂層，然后，用脫脂棉蘸無(wú)水乙醇擦拭，至脫脂棉上看不到污漬為止。
2、剪鉗，刀片，研缽使用前必須用脫脂棉蘸無(wú)水乙醇擦拭接觸樣品部位2~3遍，脫脂棉上看不到污漬方可使用。
3、裝樣品的塑料籃每月至少用洗潔精清洗一次，如有明顯斑點(diǎn)、粉塵、則應(yīng)立即清洗。
4、樣品拆分臺(tái)面每天定時(shí)清理，所有工具應(yīng)整齊，按類別擺放，臺(tái)面用紙巾擦拭，應(yīng)無(wú)黑斑。
5、玻璃容器(燒杯，試管，漏斗，三角燒瓶，培養(yǎng)皿)、玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管)、新購(gòu)置的玻璃器皿應(yīng)在硝酸(10%)溶液內(nèi)先浸泡6小時(shí)方可使用。
6、 應(yīng)把玻璃器皿內(nèi)的溶液倒入廢液桶，自來(lái)水沖洗一遍后，方可收集一起浸泡，以免交叉污染。
7、玻璃容器，玻璃量器盡可能分開(kāi)用自來(lái)水浸泡，且讓水能完全進(jìn)入器皿中，不應(yīng)留有氣泡。
8、燒杯，試管，漏斗，三角燒瓶，培養(yǎng)皿等可用瓶刷沾上洗衣粉或洗潔精刷洗，然后用自來(lái)水充分沖洗干凈。玻璃量器不可刷洗。
9、玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管)應(yīng)用上洗衣粉或洗潔精涮洗，最好用熱水(60~70℃)。
10、玻璃器皿經(jīng)洗滌后，若內(nèi)壁的水是均勻分布成一薄層，表示油垢完全洗凈，若掛有水珠，則還需用洗滌液浸泡數(shù)小時(shí)，然后再用自來(lái)水充分沖洗。
洗滌液的配制與使用
洗滌液的配制洗滌液分濃溶液與稀溶液兩種，配方如下：
①濃溶液：
重鉻酸鈉或重鉻酸鉀（分析純）50g
自來(lái)水 150mL
濃硫酸（分析純） 800mL
②稀溶液：
重鉻酸鈉或重鉻酸鉀（分析純） 50g
自來(lái)水 850mL
濃硫酸（分析純） 100mL
配法都是將重鉻酸鈉或重鉻酸鉀先溶解于自來(lái)水中，可慢慢加溫，使溶解，冷卻后徐徐加入濃硫酸，邊加邊攪動(dòng)。配好后的洗滌液應(yīng)是棕紅色或桔紅色。貯存于有蓋容器內(nèi)。
帶好長(zhǎng)橡膠手套，除去器皿內(nèi)的水，慢慢倒入洗滌液，轉(zhuǎn)動(dòng)器皿，使洗液充分浸潤(rùn)不干凈的器壁，數(shù)分鐘后把洗液倒回洗液瓶中，用自來(lái)水沖洗器皿。若器壁上粘有少量殘?jiān)?，可先將洗滌液加?加入少量洗液浸泡殘?jiān)?/p>
注意: 本操作有危險(xiǎn)性!
1.洗滌液中的硫酸具有強(qiáng)腐蝕作用，千萬(wàn)別忘記將器皿取出沖洗；洗滌液若沾污衣服和皮膚應(yīng)立即用水洗，再用蘇打水或氨液洗；如果濺在桌椅上，應(yīng)立即用水洗去或濕布抹去；
2.玻璃器皿投入前，應(yīng)盡量干燥，避免洗滌液稀釋；
3.此液的使用僅限于玻璃和瓷質(zhì)器皿，不適用于金屬和塑料器皿；
4.有大量有機(jī)質(zhì)的器皿應(yīng)先行擦洗，然后再用洗滌液，這是因?yàn)橛袡C(jī)質(zhì)過(guò)多，會(huì)加快洗滌液失效。此外，洗滌液雖為很強(qiáng)的去污劑，但也不是所有的污跡都可清除；
5.盛洗滌液的容器應(yīng)始終加蓋，以防氧化變質(zhì)；
6.洗滌液可反復(fù)使用，但當(dāng)其變?yōu)槟G色時(shí)即已失效，不能再用。
經(jīng)洗滌過(guò)的玻璃容器倒置，至無(wú)水滴滴下用硝酸(10%)溶液浸泡至少12小時(shí)，用水涮洗后方可使用。浸泡溶液每星期檢測(cè)一次Pb Cr Cd Hg含量，超過(guò)1ppm則更換溶液。
玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管) 用硝酸(30%)溶液浸泡至少12小時(shí)后，用DI水涮洗后，在無(wú)塵處倒置晾干水分，自然干燥。
玻璃容器(燒杯，試管，漏斗，三角燒瓶，培養(yǎng)皿) 放在電烘箱中烘干，烘箱溫度為105℃,保持通風(fēng)烘1~2h即可。
清洗好的玻璃儀器要分門(mén)別類地存放，以便取用。
1 塑料器皿
塑料漏斗參照玻璃漏斗清洗步驟，可與玻璃漏斗一同清洗。
聚四氟乙烯燒杯和微波消解罐須與玻璃器皿分開(kāi)處理，先用自來(lái)水沖洗干凈后，再用配制好的酸液浸泡至少12h。
酸液配制方法：500mL硝酸+100mL冰乙酸，水定容于1000mL容量瓶。
酸液每半個(gè)月檢測(cè)一次Pb，超過(guò)5ppm則更換溶液
注意:勿用毛刷刷洗塑料器皿!
2 陶瓷坩鍋
可參照聚四氟乙烯燒杯和微波消解罐清洗方法。
若依然不能清洗干凈，將陶瓷坩鍋置于電熱板上加熱至無(wú)水份后，放入馬氟爐中，保持800℃烤2h，取出冷卻。
清洗好的陶瓷坩鍋內(nèi)壁應(yīng)潔白無(wú)深色斑點(diǎn)。
3 臨床基因擴(kuò)增（PCR）檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范
為避免污染，必須嚴(yán)格遵循《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》設(shè)置臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室。
4 試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
貯存試劑和用于標(biāo)本制備的材料應(yīng)直接運(yùn)送至試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)，不能經(jīng)過(guò)產(chǎn)物分析區(qū)。
含反應(yīng)混合液的離心管或試管在冰凍前都應(yīng)快速離心數(shù)秒?！ ?/p>
主反應(yīng)混合液的組成成份尤其是聚合酶的適用性和穩(wěn)定性通過(guò)預(yù)試驗(yàn)來(lái)檢查，評(píng)價(jià)結(jié)果必須有書(shū)面報(bào)告。
在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，操作者必須戴手套，并經(jīng)常更換。
嚴(yán)禁用嘴吸取液體，加樣器和吸頭等必須經(jīng)高壓處理。
工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。
5 標(biāo)本制備區(qū)
正確使用加樣器。由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。
用過(guò)的加樣器吸頭必須放入專門(mén)的消毒容器內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室桌椅表面每次工作后都要清潔，實(shí)驗(yàn)材料如出現(xiàn)外濺，分別處理并作記錄。
對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)適當(dāng)?shù)淖贤庹丈?254nm波長(zhǎng)，與工作臺(tái)面近距離)適合于滅活去污染?？梢苿?dòng)紫外線管燈可用來(lái)確保工作后對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面的充分照射。
樣本處理對(duì)核酸擴(kuò)增有很大影響，必須使用有效的核酸提取方法，可在開(kāi)展臨床標(biāo)本檢測(cè)前對(duì)提取方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。
用于RNA擴(kuò)增檢測(cè)的樣本制備好以后，應(yīng)立即進(jìn)行cDNA合成，因?yàn)閏DNA鏈較RNA穩(wěn)定，保存相對(duì)容易。為保證逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的需要，應(yīng)在標(biāo)本制備區(qū)設(shè)置一個(gè)以上的溫育裝置。
6 cDNA合成的理想溫度依所使用的酶而定，傾向于使用一步法：
即使用在擴(kuò)增反應(yīng)緩沖液條件下具有逆轉(zhuǎn)錄活性的熱穩(wěn)定的DNA聚合酶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，其較cDNA合成后再開(kāi)蓋以調(diào)節(jié)緩液或加入聚合酶進(jìn)行擴(kuò)增發(fā)生污染的可能性降低。
待測(cè)RNA的cDNA拷貝須保存在標(biāo)本制備區(qū)，不得在本區(qū)對(duì)樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
7 擴(kuò)增區(qū)
不能從本區(qū)再進(jìn)入任何“上游”區(qū)域，可降低本區(qū)的氣壓以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。
為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動(dòng)。如有加樣則應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
打開(kāi)預(yù)處理過(guò)的反應(yīng)混合液時(shí)必須防止液體濺出，尤其是在巢式擴(kuò)增步驟之間。一個(gè)簡(jiǎn)單的方法是在打開(kāi)反應(yīng)管前快速離心數(shù)秒?！ ?/p>
完成操作及每天工作后都必須對(duì)實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面進(jìn)行清潔和消毒，紫外照射方法與前面區(qū)域相同。如有溶液濺出，必須處理并作出記錄。
8擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
下述操作在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行：擴(kuò)增片段的測(cè)定。
核酸擴(kuò)增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣（如，膜上或微孔板上探針雜交方法、瓊脂糖凝膠電泳等）
目前國(guó)內(nèi)的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標(biāo)記的微孔板上探針雜交方法，PCR-ELISA方法，也有膜上探針雜交方法。
注：本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源，因此必須注意避免通過(guò)本區(qū)的物品及工作服將擴(kuò)增產(chǎn)物帶出。
小結(jié)
嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室清潔衛(wèi)生要求開(kāi)展各類實(shí)驗(yàn)，是保證實(shí)驗(yàn)有效運(yùn)行與實(shí)驗(yàn)員安全工作的前提。要不斷完善實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生管理體系，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)員的安全意識(shí)，保護(hù)員工的人身安全，確保實(shí)驗(yàn)室工作在清潔、安全、有序的條件下進(jìn)行。
