《GB 4789.4 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)》征求意見(jiàn)稿編制說(shuō)明

 本標(biāo)準(zhǔn)于 2019 年立項(xiàng)（項(xiàng)目編號(hào) spaq-2019-50），項(xiàng)目承擔(dān)單位為深圳海關(guān)食品檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心、 國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心、廣東省微生物研究所和中國(guó)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會(huì)。2019 年 11 月在北京召開項(xiàng) 目啟動(dòng)會(huì)，啟動(dòng)會(huì)后項(xiàng)目組正式協(xié)調(diào)成立，在廣泛調(diào)查研究和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的基礎(chǔ)上，起草了本標(biāo)準(zhǔn)，并邀請(qǐng) 五家專業(yè)技術(shù)機(jī)構(gòu)進(jìn)行方法標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證工作。2021 年 7 月形成標(biāo)準(zhǔn)草案，2021 年 7 月至 8 月在行 業(yè)內(nèi)征求意見(jiàn)，期間未收到重大分歧意見(jiàn)，2021 年 9 月 8 日形成《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙 門氏菌檢驗(yàn)》送審稿。2021 年 11 月 29 日經(jīng)第二屆食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)審評(píng)委員會(huì)微生物檢驗(yàn)方法與規(guī)程專 業(yè)委員會(huì)第七次會(huì)議審查通過(guò)。 

具體修訂情況如下：

1.主要變化內(nèi)容   

 

本標(biāo)準(zhǔn)與GB 4789.4-2016相比，主要變化如下： 

修改了設(shè)備和材料、培養(yǎng)基和試劑； 

修改了檢測(cè)流程和操作步驟；

修改了附錄A和附錄B。 

本標(biāo)準(zhǔn)中生雞肉、糕點(diǎn)、乳粉、果蔬制品等食品基質(zhì)的靈敏度(LOD50)在0.43 CFU/25g～0.97 CFU/25g 之間。 乳粉是經(jīng)過(guò)高溫噴霧干燥的產(chǎn)品，其中的沙門氏菌一般處于受損狀態(tài)。乳粉中沙門氏菌檢驗(yàn)的前處理， 如果進(jìn)行快速混勻，適應(yīng)了乳粉干燥環(huán)境的受損沙門氏菌可能會(huì)出現(xiàn)滲透壓休克。采用浸泡法室溫靜置一段時(shí)間后再進(jìn)行預(yù)增菌，可以促進(jìn)受損沙門氏菌的復(fù)蘇。 

2.培養(yǎng)基變化：

SC 適用于傷寒沙門氏菌的選擇性增菌，我國(guó)傷寒、副傷寒的發(fā)病率已從 10 例/10 萬(wàn)下降到 0.8 例/10 萬(wàn)左右，本次修訂用 RVS 代替 SC 作為食品中沙門氏菌檢驗(yàn)的選擇性增菌液，培養(yǎng)溫度為42℃。并且TTB培養(yǎng)時(shí)間增加了一個(gè)36℃。

 

3.增菌變化：

 

a、預(yù)增菌時(shí)增加對(duì)乳粉的處理要求:

乳粉是經(jīng)過(guò)高溫噴霧干燥的產(chǎn)品，其中的沙門氏菌一般處于受損狀態(tài)。乳粉中沙門氏菌檢驗(yàn)的前處理，如果進(jìn)行快速混勻，適應(yīng)了乳粉干燥環(huán)境的受損沙門氏菌可能會(huì)出現(xiàn)滲透壓休克。采用浸泡法室溫靜置1小時(shí)進(jìn)行預(yù)增菌，可以促進(jìn)受損沙門氏菌的復(fù)蘇。  

b、選擇性增菌:可以將預(yù)增菌的培養(yǎng)液在2-5℃冰箱保存不超過(guò)72小時(shí)，再進(jìn)行選擇性增菌。

 

國(guó)內(nèi)外相關(guān)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)情況 

 

GB 4789.4 對(duì)沙門氏菌采用的是血清分型方法， GB 4789.31-2013《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué) 檢驗(yàn) 沙門氏菌、志賀氏菌和致瀉大腸埃希氏菌的腸桿菌科噬菌體診斷檢驗(yàn)》采用的是噬菌體分型方法。 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織的標(biāo)準(zhǔn) ISO 6579-1：2017《Microbiology of the Food Chain -- Horizontal Method for the Detection, Enumeration and Serotyping of Salmonella -- Part 1: Detection of Salmonella spp》，采用 RVS 作為沙門氏菌的選擇性增菌液，乳粉樣品前處理采用的是室溫浸泡法。 美國(guó) FDA 的《Bacteriological Analytical Manual Chapter 5: Salmonella》采用 RV 作為沙門氏菌的選擇 性增菌液。高背景菌樣品的選擇性增菌液 TTB 的培養(yǎng)溫度為 43 ℃±0.2 ℃，低背景菌樣品的選擇性增菌 液 TTB 的培養(yǎng)溫度為 35 ℃±2 ℃。乳粉的前處理也采用了室溫浸泡法。AOAC 的沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，與 美國(guó) FDA 的《Bacteriological Analytical Manual Chapter 5: Salmonella》的技術(shù)路線基本一致。 日本厚生勞動(dòng)省和日本國(guó)立醫(yī)藥品與食品衛(wèi)生研究所的沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，也是采用 RV 作為沙門氏 菌的選擇性增菌液。加拿大保健品與食品管理局在沙門氏菌的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) MFHPB10 的附錄 J 中特別說(shuō)明， 由于環(huán)保和安全的原因，用 RVS 代替 SC。