一、滅菌前準(zhǔn)備
1、所有需經(jīng)滅菌的物品首先要清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴(yán)密，如用金屬筒應(yīng)將上面氣孔打開。
2、裝培養(yǎng)基的三角瓶塞好棉塞，用紙包好，試管蓋好蓋，注射器須將管芯抽出，用紗布包好。
二、裝放
1、大型高壓蒸氣鍋：放置滅菌物品不應(yīng)超過鍋內(nèi)容積的80%，物品應(yīng)放置鍋內(nèi)擱架上或鐵絲筐中。
2、手提式高壓鍋：將物品分別包扎好，直接放入消毒筒內(nèi)，物品之間不能過擠。
三、設(shè)備檢查
1、檢查門的開關(guān)是否靈活，橡皮圈有無損壞，是否平整。
2、壓力表蒸氣排盡時是否停留在零位，關(guān)好門和蓋，通蒸氣或加熱后，觀察是否漏氣，壓力表與溫度計所標(biāo)示的狀況是否吻合，管道有無堵塞。
3、對有自動電子程序控制裝置的滅菌器，使用前應(yīng)檢查規(guī)定的程序，是否符合于進(jìn)行滅菌處理的要求。
四、滅菌處理
手提式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應(yīng)按下列步驟進(jìn)行：
1、手提式高壓鍋在主體內(nèi)加入3L清水，立式高壓鍋加水16L（重復(fù)使用時應(yīng)將水量補(bǔ)足，水變混濁需要更換）。
2、手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣管插入消毒桶內(nèi)壁的方管中（無軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不得使用）。
3、蓋好頂蓋擰緊，勿使漏氣；通上電源，并打開頂蓋上的排氣閥放出冷氣（水沸騰后排氣10~15min）。
4、關(guān)閉排氣閥，使蒸氣壓上升到規(guī)定要求，并維持規(guī)定時間（按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況而定）。
5、達(dá)到規(guī)定時間后，對需干燥的物品，待壓力恢復(fù)到零時，即可打開排氣閥，自然冷卻至60℃后開蓋取物，如為液體物品，不要打開排氣閥，而應(yīng)立即將鍋去除熱源，待自然冷卻，壓力恢復(fù)至零，溫度降到60℃以下再打開蓋取物，以防止突然減壓液體劇烈沸騰活容器爆破。
五、滅菌溫度與時間
壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時間見下表：
| 物品 | 滅菌時間min | |
| 115℃ | 121℃ | |
| 不含糖等耐熱培養(yǎng)基 | 15 | |
| 含糖類等耐熱培養(yǎng)基 | 15-20 | |
| 染菌培養(yǎng)物 | 30 | |
| 器械器皿 | 30 | |
六、滅菌處理
滅菌后物品，按正常情況已屬無菌，從滅菌器中取出應(yīng)仔細(xì)檢查，以免再度污染。
1、物品取出，隨即檢查包裝的完整性，若有破壞或棉塞脫掉，不可作為無菌物品使用。
2、取出的物品，如為包裝有明顯的水浸者，不可作為無菌物品使用。
3、培養(yǎng)基或試劑等，應(yīng)檢查是否符合達(dá)到滅菌后的色澤或狀態(tài)，未達(dá)到者應(yīng)廢棄。
4、取出的物品掉落在地或誤放不潔之處，或沾有水液，均視為受到污染，不可作為無菌物品使用。
5、取出的合格滅菌物品，應(yīng)存放于貯藏室或防塵柜內(nèi)，嚴(yán)禁與未滅菌物品混放。
6、凡屬合格物品，應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限。
7、每批滅菌處理完成后，記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時間、操作者。
